تعيين مقدار هيدروكسي پرولينکلاژن، تاندون، اسب

ناشناس

Active member
عنوان مقاله اندازه گيري هيدروكسي پرولين تاندون اسب با استفاده از يك روش اسپكتروفونومتري اصلاح شده
نشریه پژوهش و سازندگي زمستان 1385
نویسنده رسولي علي,شمس غلام رضا,شريفي داوود

کلمات کلیدی :
هيدروکسي پرولين، کلاژن، تاندون، اسب


چکیده مقاله :

تعيين مقدار هيدروكسي پرولين به عنوان يك شاخص جهت اندازه گيري ميزان كلاژن در بافتهاي همبند و در مطالعات متابوليسم كلاژن مورد استفاده قرار ميگيرد. در اين روش پس از هيدروليز نمونه بافت تاندون با اسيد هيدروكلريك 6 مولار به مدت 16-14 ساعت در دماي 105 درجه سانتيگراد، هيدروكسي پرولين با معرف كلرآمين T اكسيده شد. بعد با افزودن معرف ارليخ و قراردادن در دماي 60 درجه سانتيگراد، محصول رنگي بدست آمد. جهت حذف مواد رنگي مزاحم، محصول رنگي در محيط قليايي توسط تولوئن استخراج شد و در مرحله بعد ماده رنگي وارد فاز اسيدي گرديد. ميزان جذب محصول رنگي در فاز اسيدي در طول موج 543 نانومتر قرائت شد و مقدار هيدروكسي پرولين نمونه بر اساس منحني كاليبراسيون محلولهاي استاندارد كه همه مراحل فوق را گذرانده بودند، محاسبه گرديد. منحني كاليبراسيون در دامنه غلظت g/ml و 160-10 خطي بود R2=0.997. دقت روش با شاخص تغييرات (CV%) بين روزها و درون روزها كمتر از 7% به دست آمد. با آزمايش شش نمونه تاندون اسب، ميزان هيدروكسي پرولين آنها برحسب ماده خشك تاندون mg/gو121- 95 (9.0±109.5) به دست آمد. اين روش آسان، اختصاصي و تكرار پذير براي تعيين مقدار هيدروكسي پرولين تاندون و بافتهاي كلاژني ديگر مانند پوست قابل استفاده است.
 
بالا